作者fc01 ()
看板Biotech
标题[求救]请问那里有"单卖"镁离子溶液
时间Tue Apr 15 16:19:16 2008
是这样的,我做的PCR,镁离子条件往往比一般的要高(2.5~4mM)
然後我用TAQ送的BUFF稀释10倍是1.5,所以我以前就非常蠢的自己配了一罐镁离子溶液
结果被老板发现了骂到臭头
然後我有试过用调整BUFF的量来调整镁离子浓度
结果到了2.5~3.0mM就P不出来了(可是PAPER建议的量是4.0mM)
我读过PAPER怀疑是钾离子太高的原因,所以乾脆还是用原来1.5mM做,反正有东西就好了
少一点也无所谓
但是现在同实验室的学妹也碰到类似问题:1.5mM嫌产物少,用BUFF调高会把钾一起加下去
然後TAQ没有附镁离子....
所以我想问到底那家有单卖镁离子的?
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.84.219
1F：推 sinwam:你问你买的taq的那一家啊!有的taq买来本身就有附一管了!! 04/15 17:23
2F：→ fc01:送的是含KCl和Tris-HCl的buffer,没有单纯的镁离子溶液... 04/15 17:35
3F：推 h3250sam:有些贵一点的taq的buffer镁离子是分离开来另外加的 04/15 18:45
4F：→ h3250sam:所以可以自己调整浓度 印象中好像是跑GC rich的taq 04/15 18:48
5F：推 JanChang:我实验室买的Taq所附的镁离子溶液是5mM，可以自己再稀释 04/15 20:48
6F：推 kaifish:我们实验室自己配制Tris-HCl和KCl的buffer,镁也是自己配的 04/15 22:21
7F：→ kaifish:我们是用Takara Taq，不晓得适不适合您使用的Taq 04/15 22:22
8F：→ fc01:我们也是用TAKARA的.... 04/15 22:47
9F：推 cutebetty:直接跟厂商说要镁离子分开的buffer,波士特跟Takara都有 04/19 16:18