作者charlielg (chi)
看板Biotech
标题[求救] 有关cloning的问题?
时间Tue Apr 15 21:08:25 2008
我要将之前实验室所留下来的cDNA进行蛋白质表现,
可是我发现之前留下来的cDNA量不足,无法进行之後
的实验(recombinant plasmid的制造),所以自己想重
新利用pcr来量化这段cDNA,於是我利用当初夹出此段
cDNA的一对primer(实验室留下来的)及以此cDNA当作
template进行pcr,并且所有pcr条件都依照当初选殖出
这段cDNA的条件来进行,结果发现目标片段浓度并不高(比原本cDNA浓度还低)
,我有是着增加template量,可是效果并无显着改善,希望大家能帮帮忙!提供意见
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 220.133.102.249
1F：推 dankai:重新合cDNA~ 04/15 21:27
2F：推 ycchiang3377:换好一点的酵素，同时可考虑把primer重新合成 04/16 12:34
3F：推 tobaccolove: 增加primer量、增加cycle数 04/17 12:41