作者aerogel (俏)
看板Biotech
标题[求救]冷冻切片及一些免疫组织染色相关
时间Tue Apr 15 23:06:48 2008
想请问板上的版友
小弟是做冷冻切片 切完sample後 会先把片子放在-20度冰箱
隔天做染色 染色前 我会先让片子降至室温 浸入Xylene 再以酒精覆水(100%->50%)
接着就是我的染色了 染色後 会发现我的支架会脱落 不是全部 不过也脱落不少
(我是将支架植入肌肉层中 所以取出後 支架会被fibrous tissue包覆住)
所以染色後 外围的tissue可以被染出来 不过中间的支架会有部份被洗掉
请问有啥办法可以尽量避免我的sample被洗掉吗?
另外... 想请问一下
做免疫组织染色时 会用一种溶液做Blocking 请问Blocking是要做啥的呢?
麻烦解答了 感激不尽
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.224.54.62
1F：推 greenmoon00:通常blocking是为了阻绝抗体的不专一性结合~ 04/16 09:45
2F：推 oopa:不知道你浸入冷冻切片染色前浸Xylene的用意是? 04/16 11:42
3F：→ oopa:建议找个IHC完整protocol(含原理)读,我记得abcam网站上可下载 04/16 11:43
4F：→ aerogel:因为我问卖包埋剂的sales 他跟我说要用xylene 04/16 22:04
5F：→ aerogel:要不然会洗不乾净 我也觉得怪怪的 所以问问板上的各位 04/16 22:05
6F：推 iiidns:他说的是 封片前要用Xylene 04/17 10:29
7F：→ aerogel:我有明确问他 他说是染色前 不是封片前 04/17 12:32
8F：推 oopa:到目前没看过这种protocol,建议你照一般步骤做观察实验的情况 04/17 21:25
9F：→ oopa:如果做得出来,protocol可以再微调细节,让结果更漂亮清楚, 04/17 21:27
10F：→ oopa:而且个人怀疑Xylene的步骤可能与你提到的"洗掉"有关(纯猜测) 04/17 21:27
11F：→ aerogel:好~ 我会试试 感谢鼎力说明 ^O^ 04/17 23:41