作者Chenyu5 (我是昱丞啦~)
看板Biotech
标题Re: [方法] 请问注射cell line至小鼠产生肿瘤模式갠…
时间Thu Apr 17 16:03:21 2008
43~
>1.原po利用的Lewis lung cancer cell不知是那种tumor cell line
> 如果我猜的没错 跟我以前应该使用应该相去不远
> 我是用B?/F10 nad B?/F0 都是melanoma cell line (lung cancer cell line)
这只细胞的名称 是B16/F10,非常恶性的cell line.
两个差别在 metastasis 能力强弱 (F10强)
如果是这类Cell 以下的资料 可提供原po一些方向
43,抱歉~
> (3) solution的量: 我都控制在80~120ul 通常我都用100ul
> 这点 我觉得200ul的确是上限 原因:
> 一只小鼠的血液量约在1.5~2.3ml 如果你一次超过总血量1/10以上的
> dilute 会对mice产生蛮大的影响在 blood system
如果给了过多的saline,会造成老鼠有shock现像
(有些shock model就是这样做的!)
> 但以前我在练习tail vein injection 一次打1ml的Saline是没问题的
> 所以原po可能在injection 可以再下点功夫改进一下
> 个人经验上,建议控制100ul真的是差不多了
> 至於细胞浓度上 应该是还好 我也有打过7次方
> 应不致於thrombosis跟对老鼠有太大伤害 反倒是i.v打进去时
> 注意一下soln.温度 太冰 老鼠会马上卦给你看
> (4) 有没有injection应该是不难看出 如果是尾巴 可以在打进去的瞬间看到
> 尾巴变白 血流会通过 但是你如果是打B6就 观查上有点难度
> 通常还有一种是利用眼窝静脉丛注射 我比较喜欢那种打法
想请问一下,利用眼窝静脉丛注射要如何进行?
是直接打到老鼠的眼窝就可以了吗?
> 因为B6的尾巴不好打
> (5) 关於针头大小 是否会影响存活率 我有做过实验
> 18G.26G.跟30G 其实并不会影响 我建议用一般1CC针筒附的那种
> 应该是26G罢 就足够了 30G 感觉上 阻力大多了
我用的是29G 胰岛空针,可是很容易一开始很顺,过一下就塞住了
是不是有怎样的姿势是容易让注射保持稳定?
还想请问一下,不管是tumor或是药物,
都可以在眼窝静脉注射这种方式去注射吗?
> (6) 关於PBS跟normal saline 其实如果练习上来讲 不建议用PBS
> 实验的经验上 PBS比起saline 老鼠似乎有时会因为打PBS而卦点
> 或许是 因为盐类的影响 所以 可以注意一下
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◆ From: 140.113.178.161
※ 编辑: Chenyu5 来自: 140.113.178.161 (04/17 21:57)
1F:推 tincta:我想请问注射cell line引起tumor的tumor大小是如何测量?为 04/21 22:14
2F:→ tincta:何我看的ref都没写清楚?有人可以提供一下哪篇ref吗?感恩 04/21 22:15
3F:推 htLiu:这种IV注射通常是META的模式 注射後28天 有成功可以在 肺看 05/08 23:57
4F:→ htLiu:到黑色结节 我是整各肺取出 去数总共有多少颗 05/09 00:00