作者vagrantlin (流浪者)
看板Biotech
标题[求救] western做不太出来
时间Sun Apr 20 17:18:17 2008
不知道怎麽回事
我有在重组蛋白质後面有加上6X his-tag
大小约60kDa
以Ni-NTA His-bind Resin去纯化时
有得到很漂亮的单一band
可是拿这个纯化後的protein去进行western时
就什麽都没有
拿学姊之前做的重组蛋白质(也有加上6X his-tag)做positive control
就有出现明显的目标band
所以 一抗二抗或底片还是基质等材料应该都是没问题的阿~~
那为什麽我拿纯化成功的蛋白质去做western就什麽都没有呢?
是我哪里没有注意到吗
希望有把我的疑问点讲清楚
烦请各位先进前辈高手指导
谢谢 @___@
--
人和人之间没有理解，所了解到的事都是自己的...
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.38.171
1F：推 alaric:跑一下Total Protein的Western 确定一下是不是有表现.. 04/20 22:43
2F：推 zeratul1396:你的一抗是用anti-His tag antibody吗?? 04/21 19:06