作者asthma (asthma)
看板Biotech
标题Re: [求救] flow的一些小撇步!!
时间Thu Apr 24 23:07:05 2008
※ 引述《ruthwu (Ruth)》之铭言：
: 欲用flow来看细胞的apoptosis
: 目前是用AnnexinV-PE & 7AAD进行双染 (BD的apoptosis kit)
: 有些部分想请问一下:
: 1.收细胞前的wash,到底该用冰的PBS还是室温的??
皆可
: 2.直接冲下??还是以EDTA冲下??
?
: 3.resuspend cells in 1x binding buffer(是冰的还是室温呢??)
你应该是用kit, 4度C 比较适合 因为下一个步骤是........
: 在实验中,control cell(without treatment)进行单染setting时
: 发现Annexin positive细胞占了50-60%
: 同时7AAD positive细胞大约才20%
: 感觉是Annexin signal超强
染7-AAD 跟 Annexin V 的意义不同, 你了解之後就会发觉原因了
你的结果很正常 ^^
: (1*10^5 cells/100ul+3ul dye)
: 请教各位有经验的大大,给予指点迷津吧!!
: 感激不尽!!
Good luck
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