作者hosaile (我和你:))
看板Biotech
标题[求救] 湿式transfer的条件
时间Sat Apr 26 21:32:10 2008
我的protein是大约55kD的大小
我会用10%的PAGE去跑
之前用semi-dry的方式做transfer 效果一直没办法很好
transfer完用commassie blue染了以後 还是有满多protein留在胶上
所以想试试看湿式的transfer
请问各位有经验的版友, 你们进行的条件是如何呢?
感谢各位的回答了!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.122.26
1F:推 lail:我用的条件是250mA,1小时,protein marker除了182kD位置的偶尔 04/26 23:22
2F:→ lail:会有残留,其他时候胶都会是透明的,不过没染过胶,不知道实际残 04/26 23:23
3F:→ lail:留情形如何 04/26 23:23
4F:→ hosaile:谢谢你的回答喔~ 04/26 23:34
5F:推 chvkimo:我曾经400mA冲一个小时 但是要在冷房内 或放在冰箱 04/28 15:37
6F:→ chvkimo:还有transfer buffer不要re-use太多次 通常2~3次吧 04/28 15:38
7F:→ chvkimo:如果 buffer 暴露空气太久 就换新的 04/28 15:39
8F:→ hosaile:感谢你! 04/28 16:41