作者emmam ()
看板Biotech
标题[求救] 细胞质/细胞核 蛋白质的分离
时间Tue Apr 29 20:56:15 2008
各位大大好!
想要问，分离细胞质/细胞核的protein之後，
有什麽方法可以检查是否有分离完全呢?
(目前我只有跑过SDS-PAGE，发现protein的pattern不同，
但是某些分子量的蛋白质在质and核的部分都有出现)。
我的目的是在分离之後，
跑Wesern 看我的目标蛋白质有没有进入细胞核。
查到相关的资料都只有叙述核/质分离的方法，
而没有检察是否分离完全的检查。
此外，
这部分也打算做萤光染色，并以confocal观察。
想请问一下，
用什麽染细胞核比较清楚呢?
最好是红色萤光。
如果有什麽冒犯的地方，也请不吝指教。
谢谢!
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.166.233.14
1F：推 aggaci:有些蛋白质只在cytosol出现 如tublin 04/29 22:16
2F：→ aggaci:红色 就PI吧 04/29 22:17
3F：推 liuse:核外染tubulin 核内就染histone吧 04/30 00:07
4F：推 blence:除非要看chromatin fraction,不然histone不好extract完全, 04/30 00:17
5F：→ blence:而且PAGE的％可能不在一般常用范围,会很麻烦 04/30 00:18
6F：→ emmam:查到一个HCS CellMask,但核/质都会染上，有人用过吗? 04/30 12:39
7F：推 jjogp:核外 tubulin 核内 lamin 05/01 14:17
8F：→ jjogp:通常paper有分核质的应该都有control才对 再多几篇吧 05/01 14:20
9F：→ jjogp:多找几篇 05/01 14:21
10F：→ emmam:谢谢! 谢谢! 我先试试看 ~ 05/03 00:59