如Proteomics说的，你的蛋白质溶液还有很多杂质， 离细胞用的低转速很难把supernatant完全吸除， 一不小心就会吸到细胞，而残留的supernatant都是会干扰IEF的， 所以还要做沈淀才行，或是其他纯化的方法， 用kit或filtration都可以让盐类等杂质变少， 另外要看有没有杂质可以观察IEF的电压， 如果连在低电压时电流都很高的话就有问题了 ※ 引述《kakaman (日子过的真快阿)》之铭言： : 做了好几遍 : 出现的状况都一样 : 就是点很少 超极少... 少到不敢拿给老师看... : 查了2D的trouble shooting : 发现原因可能有几个: : 1.定量错误 这点已经排除了 拿去跑western染银染染的出来 : 2.buffer:这点应该也排除了 有跟其他实验室拿他们的buffer来跑 : 3.有干扰物:怀疑是sample核酸过多导致我的点看起来只有少数5.6点... : 因为实在没什麽经验而且实验室也没有经验丰富的人 : 所以至今还在不停的找问题在哪 但是做了又做 问题好像还是一样 : 可以请板上有经验的大大们给我指点迷津吗? : 谢谢 烦恼好久了~~ --

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