作者beautyfish (天使光)
看板Biotech
标题Re: [求救] DNA总是切不好
时间Mon May 5 15:44:09 2008
不好意思自己回自己的文XD
我後来DNA已经有切好了
我的切法是取20ug的DNA 把体积切到50ul
此时酵素用的量为1.5ul
切了3~4小时後 又补了一次1.5ul的酵素
这边是用1.5ul的酵素加buffer之後补水让总体积成为50ul
再加进去到原先切的那50ul的reaction中 total 100ul 切O/N
这样跑出来的DNA很漂亮
老板说是有切开了这样
提供大家参考一下
之前有板友提到说我使用的EcoR1与BamH1不需要切那麽久
但是在我的情况中 我切了三小时後有先取一点去跑电泳
由於大多数的DNA还是累积在上面没有跑下来
所以我还是又多补了酵素去切
谢谢^^
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◆ From: 140.120.196.22
1F：推 dankai:请问你的酵素是用多少unit?? ^^ 05/05 16:45
2F：推 xenopus:EcoRI切太久不会有问题吗? 05/06 13:05