作者mouung ()
看板Biotech
标题Re: [求救] SDS-PAGE dye往上浮
时间Wed May 7 18:10:52 2008
其实有些微漂浮的情形的话不用太在意
快速load好以後加电场就会往下跑了
不过如果浮的太夸张 已经快速跑出well的话就没办法了
提高sample buffer的比例应该可以改善这个情形
※ 引述《mason (牲牲不息)》之铭言:
: 感谢各位大大的解答,
: 後来发现确实是因为0.1M ammonium acetate(高盐度)的关系造成
: glycerol比重不足而往上飘,
: 所以我就将sample和 sample buffer和agarose混合成 0.5%左右的mixture,
: 加热冷却再稍微加热溶解後趁还没凝固就注入well
: 凝固後就不怕他飘出了了^_^
: 後来就一切顺利了, 给大家参考, 也许遇到类似的情况可以试一试^^
: 谢谢大家, 这里都是好人:)
: ※ 引述《[email protected] (六百)》之铭言:
: : 很奇怪的做法
: : 你的意思是说你是先把 sample load 到空的 well (里面只有空气)里面
: : 然後再灌 running buffer?
: : 我觉得这样应该不对吧
: : 应该是先灌满 running buffer, 然後再 load sample
: : 如果这样还会漂的很严重 就是你的 sample buffer 配制不当了
: : ---
: : 或者如果你说的 load 的过程里面
: : 因为设备有一些渗漏而导致 running buffer 液面下降
: : 则我的习惯是先run 一下 让 sample 都跑进 stacking gel 里面以後再补满
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※ 编辑: mouung 来自: 131.215.220.163 (05/07 18:12)