作者bjuh (。)
看板Biotech
标题[求救] DCFH-DA测ROS
时间Wed Feb 5 18:43:37 2014
目前实验要测ROS
看到的方法有满多种，分别是flow、Fluorescence Spectrophotometer及fluorescence microscopy
我是要用Fluorescence Spectrophotometer来测
而Fluorescence Spectrophotometer又看到两种作法，分别是
1.以DCFH-DA染色30分钟後，PBS洗两次，TE将细胞切下并离心去除染剂，再用PBS回溶细胞
之後load进96 well plate测定。
及
2.以DCFH-DA染色30分钟後，PBS洗两次，之後用RIPA(TritonX100)打破细胞，
直接取细胞液进行测定。
想请问各位先进 以Fluorescence Spectrophotometer测定ROS揪竟需不需要破细胞这个动作呢?
请帮我解惑 非常感谢大家
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.104.143
1F：→ a001ou:你这两个测定都是萤光读盘的步骤 萤光显微镜不需要破细胞 02/06 00:29
2F：→ a001ou:染完 PBS洗净後 即可上显微镜 02/06 00:30
3F：→ bjuh:我是要萤光读盘测485nm/520nm的，所以方法1.2都可以吗? 02/06 00:54
※ 编辑: bjuh 来自: 114.33.46.67 (02/06 01:00)
4F：→ a001ou:都可 02/07 23:30