作者tigernaxo ()
看板Biotech
标题[求救] NEB跟Thermo的RE是可共用buffer
时间Fri Mar 14 11:47:46 2014
手上有NEB的SpeI和fermentas的HindIII (都是普通版本，非FD、非HF)
现在要做double digestion，但是RE的厂牌不同...
我查fermentas的SpeI用Tango buffer可以有100%活性
如果用NEB的SpeI加进Tango buffer，和HindIII一起切，这样行得通吗？
由於实验室穷到爆炸，买enzyme应该是下下策，求有经验的前辈帮忙解惑...
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◆ From: 60.251.145.32
1F：→ blence:你的第3行,NEB的HindIII在buffer2也有100%,不也可以反过来? 03/14 12:52
2F：→ blence:通常结论都会是"分开切",不过如果要试,SpeI在buffer2是100% 03/14 13:07
这实验室gel elute kit剩下的数量...不容许我做这件事 ...
3F：→ blence:而且F的HindIII在R(tango反而不好)是100%,R与2是最靠近的 03/14 13:09
没NEB 2，只有Cutsmart buffer(4+BSA的版本)(整间实验室只有一支NEB的enzyme...)
别的实验室很遥远，借buffer来回要两小时...所以先考虑Fermentas的去弄
而且HIndIII很便宜，-20C里面还有不少，所以才会想以配合SpeI为主
4F：→ blence:不过实验室真的有经费考量,还是别乱试比较保险 03/14 13:11
5F：→ xxtomnyxx:我以前实验室是 NEB 和 Roche，基本上是相容的。 03/14 13:20
6F：→ xxtomnyxx:NEB 有提供 Buffer 的配方，如果 Thermo 也有提供，你可 03/14 13:21
7F：→ xxtomnyxx:以去比对看配方是不是类似的，如果是类似的当然可以共用 03/14 13:22
8F：→ xxtomnyxx:如果你想保险起见，就先拿少量做个测试吧！ 03/14 13:23
谢谢，我先试少量跑胶看看好了
※ 编辑: tigernaxo 来自: 60.251.145.32 (03/14 14:15)