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拍谢 这是小弟第一次发文 如果排版不好还请见谅 不知道版上有没有人有对TALENs或者是CRISPR有所涉略? 最近我老板要我去找相关PAPER 也看了几篇有所理解 似乎是出错率低又精准的技术 不知道各位版友怎麽看? --



※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.17.107
1F:→ soom:可否再说明一下你的想法,以便抛砖引玉,帮助讨论 03/19 13:11
2F:→ newmankind:我也想找这方面的资讯,虽然TALEN有kit, 03/19 14:40
3F:→ newmankind:不过用的人好像不多 03/19 14:40
4F:→ newmankind:有用过的先进,可以分享一下心得吗? 03/19 14:41
5F:→ newmankind:目前个人的理解是,虽然宣称是knockout基因, 03/19 14:42
6F:→ newmankind:不过好像有需要特别的序列(结构?) 03/19 14:43
7F:→ blut0806:目前我是TALENs的paper看得比较多, CRISPR则 03/19 15:59
8F:→ blut0806:仅在一篇review读过, 03/19 16:00
9F:→ newmankind:Addgene(联奇)有出一套TALEN的KIT,不过成大没人用过 03/19 16:06
10F:→ newmankind:也不知道效果好不好 03/19 16:06
11F:→ blut0806:而整个TALENs的构成,都是两两一组,分别定位在指定的DNA 03/19 16:06
12F:→ blut0806:双股两侧, 可以这麽办到是因为TALENs的结构,在一个单元 03/19 16:08
13F:→ blut0806:体中, 重要的部分有二, 一是C端的FokI及整组结构中间的 03/19 16:10
14F:→ blut0806:DNA binding domain,则由约15个胺基酸的重复序列构成 03/19 16:16
15F:→ blut0806:而该重复序列则由约34个胺基酸构成,但其中重要的是第12 03/19 16:19
16F:→ blut0806:及13个,这边决定了该段所结合的核苷酸对象 03/19 16:22
17F:→ blut0806:结构大概是这样吧...话说要怎麽用图片上来? 03/19 16:27
18F:→ blut0806:至於new大你说的那个KIT我也没有用过QAQ 03/19 16:29
19F:推 mesenchymal:https://www.addgene.org/TALEN/guide/ 03/19 23:37
20F:→ mesenchymal:现在CRISPR正火,因为你只需要的是guide sequence 03/19 23:49
21F:→ mesenchymal:specific binding to DNA element, 不像TALEN需要 03/19 23:50
22F:→ mesenchymal:protein DNA binding (而一些papers claim CRISPR 03/19 23:51
23F:→ mesenchymal:offtarget effect 相对小,Cas9相关paper也几乎是一个 03/19 23:51
24F:→ mesenchymal:月就可能出好几篇,应用也不再局限於 gene knockout 03/19 23:52
25F:推 mesenchymal:http://ppt.cc/Y-nQ 你可以看一下这篇讨论 ZFN,TALEN 03/19 23:56
26F:→ mesenchymal:还有CRISPR的比较,http://ppt.cc/~HJc 这篇则是较新的 03/19 23:59
27F:→ mesenchymal:CRISPR应用的整理 03/19 23:59
28F:推 datro:力钧的教学 算上的蛮清楚的 可以去听看看 03/20 01:32
29F:→ blut0806:M大:我先看下应用那篇, D大:力均是指?拍谢我接住这个领域 03/20 08:46
30F:→ blut0806:没多久还望海涵诸多不懂. 03/20 08:46
31F:→ blut0806: 接触 03/20 08:47
32F:推 newmankind:感谢m大资讯,我也来看看 03/20 10:53
33F:推 demoiselle:力钧现在在促销CRISPR,举办多场workshop,亲自参加操 03/20 18:22
34F:→ demoiselle:作ㄧ遍,应该会很有收获吧! 反正是免费的~相信workshop 03/20 18:22
35F:→ demoiselle:中也会比较几种传统的制作方式跟CRISPR的优缺点 03/20 18:23
36F:推 mesenchymal:刚去看了一下poster,发现张锋lab那套Cas9 knockout 03/21 08:26
37F:→ mesenchymal:creen library未来应用性很大,有兴趣可看 03/21 08:27
38F:→ mesenchymal:http://ppt.cc/2qk3 03/21 08:27
39F:推 newmankind:下礼拜成大有办一场,来去听听看 03/21 22:13







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