※ 引述《derren (我想要ㄉ幸福M)》之铭言： : 跪求各位高手~ : 我们的实验是做primary cortical cell 有混和的神经细胞及神经胶细胞 : 最近在做DAB染色 利用hematoxylin做counterstain 染细胞核 : 可是发现细胞单染hematoxylin时就会有像neuron的细胞型态出来 : 如图http://ppt.cc/GIXH 可以看到深色细胞核还有轴突或树突的型态 : 导致在染NeuN (neuron marker)时根本无法分辨哪一些是positive cell : 算positive cell时会多算很多 : 我有试用改用萤光染色染dapi跟NeuN 结果NeuN根本没那麽多 : 如何解决hematoxylin会染到像神经细胞的型态呢? : 还是他本来就不适用染神经细胞? 有什麽可以替代的方法呢? : 谢谢大大!! 刚看了一下 把你的图重新白平衡後是这样 http://ppt.cc/xpVD 说真的 这个视野下的神经细胞核基本上我可能会判定没有上 有上的是细胞质 还有旁边的microglia cells 如我刚刚推文里讲的 DAB和Hematoxylin是两种色系 用肉眼判读理论上除非染过头都变黑 不然都是有办法判读 如果是用电脑判读就更简单 直接把该色系挑出来 然後神经细胞核大小会比microglia大 这样就很好判读 如果这样还很困扰你 你可以试试hematoxylin再染短一点时间 或是乾脆换成孔雀绿好了... 同时回答你萤光染色的问题 基本上我看你这张IHC的我都觉得没什麽NeuN阳性了 所以萤光染色应该也不会多到哪里去 所以你染色可能技术没问题 只是判别上不熟悉罢了 --

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