作者windcloud27 (比币)
看板Biotech
标题[求救] SDS-page 底下一条线分不开
时间Tue May 6 22:06:42 2014
最近我们实验室配出来的page最底下都会有一条线,导致下面的band都看不清楚
↓这是以前跑的正常的page
http://ppt.cc/gQY8 http://ppt.cc/lFi7
↓这是最近跑出来的page
http://ppt.cc/8t~0 http://ppt.cc/XNJd
照理说那条线在绿色的marker跑到剩1/10左右他就要跑到底了
但是现在他都一直跟marker在同一个水平
跑的条件都没变所以应该不是电压电流或配方的问题
我们acrylamide、APS、TRIS都有重配过，但是还是没有回复正常
请问还有可能是甚麽问题啊?谢谢!
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1F：→ jsi:gel %是不是不一样? 05/06 23:17
gel都是配15%的
2F：推 mesenchymal:loading Dye? 05/06 23:23
dye倒是没重配...
3F：→ roy047:白金丝看有没有锈掉 换tank看看 05/06 23:33
tank有两个 不过应该不会那麽巧所有人都一直拿到同一个吧@@
不然就只好两台一起用 不然分不出来QQ
※ 编辑: windcloud27 (36.226.228.44), 05/07/2014 01:12:09
4F：推 mesenchymal:光用protein Ladder来比的话, gel%似乎改变了 05/07 02:01
5F：→ mesenchymal:现在的比较像10-12%的 05/07 02:03
阿...其实我这几张是不同人跑的，时间会有点不一样
但是我突然想到我们acrylamide是用40%稀释的，不知道会不会配得人稀释过头了
※ 编辑: windcloud27 (36.226.228.44), 05/07/2014 03:49:17
突然想到还有很奇怪的一点是那条线似乎也会盖到marker那栏well去?
有人跑过中间空很多格well 跑完之後那条线还是会全部都会有
※ 编辑: windcloud27 (36.226.228.44), 05/07/2014 03:52:36
6F：→ roy047:如果做胶时没凝好 上下胶交界太多水的话 跑到那边会漫开 05/07 07:04
应该不是喔 我有试过下层凝完还去把液体吹掉 也是失败
※ 编辑: windcloud27 (36.226.228.44), 05/07/2014 17:21:48
7F：推 hsnuyr:tris8.8的ph值如果不对会影响 05/09 13:54
8F：→ hsnuyr:我的经验是偏硷分太开 偏酸分不开 05/09 13:55
9F：推 jhjhs33504:DTT? 05/11 03:07
日前重配了Acrylamide似乎没有改善 老板说要直接买新的Acrylamide
dye的部分也打算要重配了 现在是先看看找以前用剩的dye看会不会有问题
另外印度人博班说试试用Urea取代dye看看会不会改善
※ 编辑: windcloud27 (36.226.228.201), 05/13/2014 10:11:36
10F：→ blence:你们是40%自己先配好15% pre-mix喔？ 05/13 12:45
我们是40%稀释成30%冰着 然後配的时候再按比例配成15%
※ 编辑: windcloud27 (220.129.18.14), 05/15/2014 03:35:50