作者gto33456789 (太人生了)
看板Biotech
标题[求救] 蛋白质纯化(BL21)
时间Fri May 16 00:16:10 2014
大家好
小弟我用BL21 pET24a insert一段12.1Kb的蛋白进去
在做小量50ml,测试条件pretest的时候, 蛋白超粗超厚
做完wertern也确定是his-tag
之後做大量养1L时候, 蛋白就产量不高, 越来越淡
是我的菌不纯吗...还是...
感谢...
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1F：推 vetvet:shaker的转速(或是要叫'扭力？')，也要跟着体积放大！ 05/16 01:00
2F：→ vetvet:否则空气不够，就会长不好~ 05/16 01:01
3F：推 ko363630:发酵的做法 跟小量的做法不一样 当然会变低 05/16 01:49
4F：→ rurucherry:转度跟摇瓶大小都可能有关唷 05/17 01:08
5F：推 abcm1042:菌够多吗? 养的菌是第一代还是挑菌再涂盘第N代 05/17 04:38
6F：→ ninetoweregg:蛋白产量不高是指整体还是上清液的soluble不多?? 05/18 10:05
7F：→ jsi:破菌完全不完全也会影响，曾改用French press破菌，产量增加 05/18 22:31