※ 引述《pandagod (熊猫在这儿)》之铭言： : 请问有没有人有这种经验的? : dissect组织下来後通常第一天要使用PFA 隔夜 来FIX组织 : 但是昨天做实验 最後竟然忘记换PFA 一直把他泡在PBS : 今天早上才发现... : 看到组织都有点软趴趴的 : 想请问对後续的分析是否会造成影响 (免疫染色之类的) : @_@ : 请求前辈的经验谈 感谢 这真的很难说 要看你组织degrade的速度如何 如果是enzyme多的组织像是胰脏和肠黏膜之类的可能已经分解的差不多了 再来就是你pbs的渗透压是不是有调到比较等张的情形 这样泡一整晚细胞也不会膨胀炸掉 另外还要考量到你所要侦测的抗原蛋白degrade的速度 有的很慢才会被分解掉 像是myoglobin类的 这个基本上屍体死了两三天了 还是染的到 但有的蛋白也很快就分解掉了 保险一点我是建议用PFA固定完之後先做张H&E观察看看细胞型态 看看是否还正常 毕竟你之後要观察的蛋白也是在细胞的某些部位表现的 如果细胞在H&E下面都看不出型态了 就算染IHC染的到 你也没办法判别该抗原到底在哪里表现出来的 一点建议给您看看 --

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