作者kuochuwon (黑轮桑~ YO)
看板Biotech
标题[求救] [IHC]脱水步骤中的甲醇为何不会伤害抗原
时间Thu May 22 22:30:38 2014
各位前辈们好，我是新手上路的硕一新生
最近再做IHC(immunohistochemistry)相关的实验
老师考我一个问题，IHC步骤中的脱水（dehydration）会不会
破坏(或是使变性)细胞中的蛋白质或某些抗原，我知道答案应该是不会
不然我们做IHC实验就不会用methanol来脱水了
但我google了很久，都找不到相关资料(只有说可以放心使用methanol来脱水)
到底为什麽methanol不会害蛋白质等物质变性呢?
ps: 我们所操作的model是斑马鱼,目的是要标记体内的huC/D蛋白
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1F：推 milkpa:从IHC的原理去找答案 05/22 23:01
2F：推 d200190:应该是会吧，只是antibody挑可以抓denatured protein的 05/23 16:59
4F：→ kuochuwon:感谢1F和2F连结，回去後仔细读看看 05/23 17:42
5F：→ kuochuwon:找到答案了,但和所给的连结没什麽关系... 重点是IHC步骤 05/27 22:43
6F：→ kuochuwon:中做的PFA fixation就有避免甲醇使蛋白变性的效果 05/27 22:43
7F：→ d200190:连结就有提PFA fixation可能造成变性啦...已经变性当然就 05/28 15:42
8F：→ d200190:不怕methanol了 05/28 15:43
9F：→ kuochuwon:没想到你回了XD 06/17 15:59
10F：→ kuochuwon:有点不懂,PFA应该不会造成变性吧?连结失效了所以我没办 06/17 16:00
11F：→ kuochuwon:法再次看,你说PFA造成变性 ,那要binding的抗体不就无法 06/17 16:01
12F：→ kuochuwon:结合上去了? 06/17 16:01