作者Euronymous (Escape!!)
看板Biotech
标题Re: [求救] perforated patch 的原理?
时间Mon Jun 2 05:17:15 2014
※ 引述《peik35 (P)》之铭言:
: 想请问一下,最近读PAPER,有发现一个叫perforated patch(whole cell)technique
: 在paper里面,它是用来实验,当添入某一药剂时,currents与钙离子通道的情形
: 因为本身不是做电生理相关,有些名词搞不太清楚
: 如 1. perforated patch
whole cell patch clamp
简单来说就是让玻璃针里的溶液和细胞内液混合在一起,这时候整个细胞膜
和上面的离子通道的电子性质就可以被控制和测量。
whole cell patch clamp有分两种,rupture 和 peforated.
rupture顾名思义就是把针间贴住的那块细胞膜拉破,这样玻璃针内的液体
就可以灌进细胞。
而perforated patch则是在玻璃针内放入amphotericin或nigericin。
这两种化合物可以溶掉细胞膜上的部脂质,只会让某些小分子离子(Na K Cl H+)
通过细胞膜。这样子玻璃针和整个细胞就会通电(路),但细胞内的胞器就
不会因为像rupture的状况被破坏,也降低对细胞里protein/enzyme浓度的影响
由於钙离子通道在细胞内的调控受到很多protein的影响,因此如果想要研究
protein对钙离子通道的调控,perforated patch就是一个必需的方法。
: 2.还有data里面有提到: inwardly-rectifying 和 outwardly-rectifying 这两个
: 之间的差异是什麽?
离子通道当它"打开"时本身就是一个电阻,所以应该遵守欧姆定律。但偏偏事
情并不单纯。有些离子通道对於向细胞内的电流(inward current)乖乖遵守
欧姆定律,有固定的电阻,但改变电压让电流外流後,电阻变大了,所以往
外流的电流就比较小。简单说就是这个离子通道偏好往内流的电流,内流通
透性比外流通透性好,这就是inward rectify。反之亦然。
: 3. 另外这是paper上实验的Data,http://ppt.cc/hIKy , 想请问X轴与Y轴各代表实验
: 上的什麽结果呢?
如1所说,patch clamp就是把玻璃针里的溶液和细胞连成一个电路,所以你可以
控制细胞膜内外侧的电位差。简单来说, 你可以把细胞膜当成电容,离子通道
当成电阻,电容跟电阻并联,然後在这个并联的电阻和电容的电路上加一颗可
变电压的电池。X轴就是这颗电池的电压变化。 Y轴就是在不同的电压下所量到的
通过细胞膜的电流。
: 谢谢大家帮忙!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 82.83.199.29
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※ 编辑: Euronymous (82.83.199.29), 06/02/2014 05:19:16
※ 编辑: Euronymous (82.83.199.29), 06/02/2014 05:21:43
※ 编辑: Euronymous (82.83.199.29), 06/02/2014 05:33:51
1F:推 peik35:谢谢你的帮忙!! 06/02 13:28
2F:推 chaunen:赞!! 06/03 10:23