作者xxtomnyxx (翼天)
看板Biotech
标题[求救] C2C12 细胞做 MTT assay
时间Wed Jun 4 08:41:21 2014
实验室要使用 C2C12 细胞测试药物对细胞的毒性，
我该使用未分化还是分化後的 C2C12 细胞呢？
我想问一下板上有做药物毒性的人的意见。
另外，
若是使用分化後的细胞，
我是在 24 well 种细胞并使其分化的，
分化完成後基本上细胞是整个长满的状态，
我试了一次用这样的细胞测 MTT，
但是 MTT 放 2 小时後紫色结晶就爆表了，
我想到的可能解决方法有：
1. 减少 MTT 反应时间 (测试时为 2 小时)
2. 增加溶解 MTT 所使用的 DMSO 量 (测试时 24 well 用 400 ul)
3. 减少在 96 读盘上的样本体积 (测试时用 200 ul)
如果对上述条件做调整，
在 MTT assay 上会有什麽风险吗？
感谢各位！
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 42.79.173.201
※ 文章网址: http://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1401842484.A.F16.html
※ 编辑: xxtomnyxx (42.79.173.201), 06/04/2014 08:41:36
1F：→ angioadsc:你知道这药物大概的药性吗？你知道为何要加这药吗？初始 06/05 11:15
2F：→ angioadsc:细胞数会不会太多？ 06/05 11:15
3F：→ angioadsc:C2C12分化为肌肉细胞必须养满,MTT自然暴表 06/05 11:17
4F：→ mars52013146:c2c12要养到分化才具功能性吧 06/05 12:28
药物作用的对象目标是肌肉细胞，
所以应该是要使用分化後的 C2C12 细胞进行实验，
我看到有篇 short report 也是用分化後的 C2C12 做 MTT，
但是他测量的波长是用 490nm。
资料来源：
http://ppt.cc/rWut
我先试试用 490nm 测量看看好了。
※ 编辑: xxtomnyxx (42.79.17.222), 06/05/2014 14:48:50