作者MDCCLXXVI ()
看板Biotech
标题[求救] 细胞用100%EtOH固定上flow
时间Thu Jun 12 10:30:59 2014
大家好，我最近第一次用EtOH固定细胞上flow，但上机时却找不到细胞@@
步骤:
1.把细胞打起来
2.用100% EtOH 在 4'C固定O/N
3.用PBS洗两次
4.染抗体，上flow
活细胞的FSC/SSC:(右下角有一大群细胞)
http://imgur.com/aLUXS0h,qzYlaoc#1
固定的细胞FSC/SSC:(右下角没细胞@@)
http://imgur.com/aLUXS0h,qzYlaoc
离心完的pellet明显小很多，不知道没离下来，还是细胞缩水@@?
上机後调FSC和SSC也找不太到主要的细胞群
1. 请问我的做法有什麽问题吗? 还是只是我flow的电压没调对?(会跟没固定时的设定差
很多吗?)
2. 固定後细胞型态会差很多吗?
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 203.64.48.9
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1F：推 qiet:是跑什麽实验要用100%EtOH? 一般cell cycle常用70~80% 06/12 22:06
2F：→ qiet:酒精会脱水，细胞自然会变小，-20C overnight 06/12 22:07
3F：推 conective:固定用70%就可以了 06/13 01:12
4F：→ MDCCLXXVI:ok我用70@试试 thx 06/13 14:26