作者wolfling22 (夜狼儿)
看板Biotech
标题[求救] THP-1细胞不贴
时间Tue Jul 1 10:53:02 2014
大家好,目前我的实验内容是培养THP-1这株细胞,然後分装至6-well中,加PMA让
它贴在well上再进行後续实验。
可是这段时间以来不知道为什麽,细胞贴的状况非常惨不忍睹,几乎没有贴。
我试着调整过,包括提高PMA浓度至100ng/ml(每个well有2ml)、多放一天(48hr→72hr)
等,但状况都很不稳定,有时贴有时没贴。
问过实验室的学长姊,PMA应该没有过期的问题,平时都-20保存也不会坏;操作时cell浓度
也和学姊指导时一样,也有尽量mix well(左左右右前前後後晃了n次)。
有没有细胞欺负新人,有学姊在旁边镇就很乖,学姊离开後就不听话的八卦。Orz
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1F:→ KittyGod:先放上学姊的图 07/01 11:28
2F:→ untilnow:先放上学姊的图 07/01 11:40
3F:→ xxtomnyxx:在 incubator 放上学姐的照片,让细胞觉得学姊在盯它! 07/01 12:44
4F:→ roy047:incubator CO2那些应该都正常吧? 07/01 14:39
5F:→ wolfling22:QB很正常,CO2浓度也都稳定,因为是公用的不会去调@@ 07/01 14:54
6F:→ duriamon:问题主要应该是在PMA,PMA很容易降解,一定要保存在DMSO中 07/01 18:24
7F:→ duriamon:而且PMA不能反覆冷冻解冻,最好分装成一次用完的量 07/01 18:26
8F:→ duriamon:详情请上网去看Sigma的DataSheet以及它提供的paper 07/01 18:27
9F:推 apple23418:这株不是悬浮细胞吗? 07/04 14:59
10F:→ skyofsilver:回楼上,他有加PMA刺激喔~ 07/04 23:38
11F:→ alex53001:没看到PMA之前跟APPLE有一样疑问 07/07 19:53