作者Lowrider (我想我需要幸运女神...)
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标题[求救] DGGE 铸胶有气泡
时间Wed Jul 16 16:44:20 2014
请问各位有铸大片胶 (SDS PAGE) 的先进
小弟跑的是 DGGE
铸胶时也确认没气泡
预混液也有预先离心让气泡不见
但是一旦放进 buffer 里面预跑
5~60度 泡一泡就发现会有大颗气泡产生
还有遇过整个开花像蚯蚓状的花纹
这样的状况是因为 漏胶?
(这次是铸垂直胶
因为用水试的时候发现有漏一点 有另外用长尾夹帮助固定
後来就ok
不过真正铸胶的时候还是有漏一点)
或者玻璃没洗乾净呢?
还是有其他问题
比方说....
acrylamide 等等的预混液过滤的不够乾净 颗粒太大 degas 不够久?之类的
APS & temed 是没有在过滤的吧 冏rz
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1F：推 as862437:窘! 我们LAB做都没有degas这步骤，会不会是在跑电泳时 07/16 22:19
2F：→ as862437:胶片滑下拉扯的呢? 我们的玻璃也都感觉白白的洗不掉 07/16 22:19
3F：→ as862437:有洗乾净但是也不算是完全透亮的玻璃，正常可以跑 07/16 22:20
4F：推 kakaman:做过2D大片胶,没degas,顶多注胶时有敲击桌面，使气泡上浮 07/17 12:48
5F：→ Lowrider:我以前做2D 也不用 但是 DGGE 大概因为有加尿素 07/17 19:58
6F：→ Lowrider:怕溶解不完全 所以还多了过滤跟 degas... 07/17 19:59
7F：→ Lowrider:目前是要把预混液 degas後再试 07/17 19:59
8F：→ dehydrogenas:玻璃没洗乾净 APS不新鲜 07/22 14:45
9F：→ Lowrider:昨天晚上跑看起来还ok 早上来就大开花 快昏倒了 XD 07/25 11:10
10F：→ Lowrider:洗玻璃我都有洗到 噜出声音 然後用酒精擦阿~~orz 07/25 11:12
11F：→ Lowrider:莫非是 APS 太古老 @@? 2006买的 07/25 11:13