作者Struggling (Struggling)
看板Biotech
标题[讨论] 有关reagent配制的"伦理"
时间Thu Jul 17 21:21:27 2014
标题实在不知道怎麽下, 请各位大大见谅.
今天发现一件让我很崩溃的事情...
今天去别家实验室发现有人做E.coli cell lysis所用的 DNaseI, Lysozyme是直接用
药杓"取一点"然後直接加入要做cell lysis的solution 中反应.
我听了很震撼, 因为他们家不只一人这样, 据说是向同一个学姊学的方法.
我觉得如果是刚进lab的freshman真的是别人怎麽教就会怎麽做, 我可以理解...
後来我回到lab忍不住跟同事聊起这件事, 同事跟我说"我也是这样耶..."
我当下想变身成余天抱着头说"我快崩溃了~我快崩溃了~!!!
後来我终於从土石堆中爬了出来, 我在想是不是我老古板了, 原来破E.coli已经演化到
可以这样做我还不知道, 还在自以为是"崩溃"? DNaseI, Lysozyme好像是"相较"非常便
宜的东西,便宜到可以这样用了? 是不是实验可以做出来, protein可以纯>90%出来就好?
我常常嘴炮说"实验可以做出来就好", 现在我开始这句话是不是大有问题?
Anyway, 我想reagent配成stock, 依据实验的需要来使用正确的浓度/量是不争的事实.
但是我还是希望有人可以提出对这件事情更深层的见解.
谢谢
--
Sent from my iPenis
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 140.109.64.129
※ 文章网址: http://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1405603290.A.548.html
1F：推 tsubasawolfy:然後等连锁污染後再推给历史共业XD 07/17 21:53
2F：→ blence:不知道你觉得DNaseI, Lysozyme配合stock的储存期可多久？ 07/17 23:42
3F：→ blence:应该不是探讨要不要先配成stock,而是有没有依照用量添加吧 07/17 23:53
4F：→ Struggling:Sigma lysozyme's storage and stability 07/18 09:31
5F：→ Struggling:The product, as supplied, should be stored at –20 07/18 09:31
6F：→ Struggling:C, it retains activity for at least 4 years. 07/18 09:33
7F：推 biingru:哈！我在美国整个系都用这招 哈哈 07/18 09:45
8F：→ nike77114:不是应该稀释然後分装用吗@@? 07/18 15:30
9F：→ nike77114:原PO是指其他人都直接取母液? 07/18 15:30
10F：→ Ianthegood:原po应该是指直接取powder... 07/18 15:43
11F：→ Struggling:podwer 07/18 17:26
12F：→ shelix:照用量添加的话直接配在solution里会比配stock准吧 07/18 23:08
13F：→ shelix:配stock是节省时间成本 07/18 23:10
14F：推 gps0110:我在英国也这样 刚来很意外XD 07/19 01:54
15F：→ Ianthegood:如果用量很少铁定不准阿 07/19 01:57
16F：→ Ianthegood:而且reproducibility 07/19 01:57
17F：→ blence:如果原po是用sigma lysozyme一个产品说明,那好像在误导喔 07/19 15:24
18F：→ blence:那一句话,是来自powder的说明,跟你配成stock是不一样的 07/19 15:25
19F：→ blence:甚至,你没看For E.coli cell lysis,这段,清楚写着freshly 07/19 15:26
20F：→ blence:prepared字眼,如果你不确定stock放多久,反倒是你的有问题 07/19 15:29
21F：→ blence:如果你的点是没照定量随便取的确不好,可是讲powder就得斟酌 07/19 15:33
22F：推 hdikam:直接取powder+1 刚学的时候也很shock~~~ 07/21 00:46
23F：→ Struggling:如果敢在paper里methods写用podwer被accept我就没话说 07/21 12:42
24F：→ blence:你知道fresh prepare的意思吗？ 肯定不是配成stock的 07/21 13:16
25F：→ blence:我会写秤好多少powder,直接加到lysis buffer里面 07/21 13:17
26F：→ blence:另外还是请你确认一下,你的lysozyme配成的stock可以放多久 07/21 13:20
27F：→ blence:其实与其用PBS或水等配成stock放着去degrade,或用一次丢掉 07/21 13:33
28F：→ blence:跟秤好powder用lysis buffer去溶,不就是换个溶剂,有何奇怪? 07/21 13:35
29F：→ Struggling:了解, 谢谢楼上 07/21 16:55
30F：→ qumai:我也会每次从粉末开始配新的..paper就写终浓度就好 07/24 15:04
31F：→ lail:药勺是乾净的，没有沾到lysis buffer再碰到power应该就还好吧 07/29 23:08
32F：→ lail:。 07/29 23:08