作者d751549d (songla~)
看板Biotech
标题[求救] pyrosequencing dNTP浓度
时间Fri Jul 25 16:47:28 2014
发问时请注意,若是要问实验相关的问题,请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
若是求救事项涉及实验室智慧财产(例如细胞细菌植株、质体载体等)之分让,
请务必注明贵实验室愿意设立 正式合作或 签署材料分让协议(MTA),否则版工将迳行删除
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
最近实验室开始做pyroscequencing的实验
因为没有要用到前PCR
只有单纯做Pyro的部分
但因为实验要求
需要调整dNTP的浓度
但上网查都只有做PCR需要的浓度而已
厂商那边也不愿意告诉我们配方
所以想请问有经验的各位
在pyrosequencing时
dATPas / dNTP的浓度大约是多少呢?
感谢
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1F:推 gerpy:基本上自行调整dNTP只有可能造成Pyro失败,因为pyro是一个连 07/26 14:38
2F:→ gerpy:续四个Enzyme的连续反应,只要dNTP浓度不对,四个Eznyme的反 07/26 14:39
3F:→ gerpy:应就可能反正不完全,造成DATA有问题,另外就算知道了dNTP浓 07/26 14:40
4F:→ gerpy:度,每个pyro使用的cartriadge都有不同的method来丢出dNTP跟 07/26 14:41
5F:→ gerpy:Enzymes(维持反应的精细度) 07/26 14:42
6F:→ mitosi:你是在问sequencing的时候cartridge A/T/C/G 所需要的用量? 08/07 23:17