作者Ianthegood (杂碎。)
看板Biotech
标题Re: [求救] primer单位换算
时间Sat Aug 23 19:17:00 2014
※ 引述《jernie (jernie)》之铭言:
: ※ 引述《jernie (jernie)》之铭言:
: : 不好意思! 问个蠢问题
: : 如果买来的primer用245ul ddH20 溶解 Final stock 是100mM
: : 若用165ul ddH20 溶解 Final stock 是165ug/ul
: : Primer 的mw 6490
: : 但是最近要做site-directed mutagenesis, protocol上的primer是1.25 μl (125 ng)
: : of oligonucleotide control prime , 请问要怎麽计算?
: : (以上数据是假设的,因为primer还没来)
: Primer 100mM要如何换算成125ng
: (1.25ng/ul)
照你给的条件
我给两个算法
算法一 高中化学法
100mM = 0.1 M = 0.1 mol/L = (6490 * 0.1) g/L
125 nG = 1.25 * 10^-7 g = V * 649 g/L
V = [(1.25 * 10^-7) / 649] L = (1.25*10^-1)/649 / uL
= 0.000192 uL
算法二 目标浓度换算(ref. Stratagene quikchange manual p.6)
X (pmole) = 125/6490 * 1000 = 19.3 pmole
V * 100mM = 19.3 pmole
V = (19.3/100) pmole/mM = 0.000193 uL
不过一般我们primer stock都是回溶成100uM
不知道你为什麽会订到这麽大量 是一般人的1000倍
下面开放战ip
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1F:推 biingru: 小鲁我以前就是用上面两种硬算的 赞 08/25 10:31
2F:推 chaunen: 我用final 0.2uM 可以mutant成功 08/27 13:42