作者a0976134 (带蚂蚁散步)
看板Biotech
标题[求救] 有关於酒精回收失败的因素
时间Tue Aug 26 01:21:54 2014
各位研究生好 最近我有在做酵素截切DNA的切胶回收
但最近在做酒精回收却出现匪夷所思的问题想各位请教
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酵素双截切後跑胶有出现我要的band
加入3倍体积99.5%酒精和1/10体积的3M NaOAc
摇晃时溶液内有出现丝状现象
-20度冷藏1小时以上後4度 12K转速 10min
有出现白色固体沉淀 70%酒精wash过後也还在
再加水(20ul)回收前还确定pellet还在
也亲眼见到pellet回溶於水中
但是跑胶却没出现band 测DNA值也非常的差
请问是哪个步骤有问题?或是需要多加哪个步骤比较好?
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1F：→ Ianthegood: 以前有做过吗 08/26 10:24
2F：→ a0976134: 之前常做 通常有出现PELLET时 DNA量跟品质都不会太低 08/26 18:44
3F：→ a0976134: 但是有时却出现有PELLET 但回溶後值都很低的状况 08/26 18:45
4F：→ svc1213: 用什麽回收 08/26 23:54
5F：→ micocat: 先加酒精还是NaOAc 08/28 01:01
6F：→ Ianthegood: 如果要产量 -20就摆o/n 08/28 13:25
7F：→ Ianthegood: 离心60min+ 08/28 13:25
8F：→ skyken10: 可能水脏了，改用TE(10,1)回溶～ 08/29 21:46
9F：→ satasumi: 片段SIZE多大? 09/02 19:45
10F：→ a0976134: 电泳回收+酒精沉淀(先加NaOAc) 09/03 11:56
11F：→ a0976134: 500bp以下 09/03 11:56
12F：推 tynse71864: 如果没有要直接往下做不要用水吧 09/11 21:54
13F：→ satasumi: 你是在做切胶回收,还是剩余DNA样品回收?? 09/29 00:25