作者albee1992822 (albee)
看板Biotech
标题[期刊] 实验方法讨论
时间Mon Oct 13 13:23:55 2014
期刊名称
Propionibacterium acnes induces IL-1β secretion via the NLRP3
inflammasome in human monocytes
出版年份
Published in final edited form as:
J Invest Dermatol. 2014 February ; 134(2): 381–388. doi:10.1038/jid.2013.309.
文献网址
http://ppt.cc/xsQC
大致内容如下
以痤疮杆菌刺激细胞看发炎路径 确认IL-1β会不会经由NLRP3表现
再看是否由caspase1切割IL-1β使其成熟分泌
文中提到这个发炎路径还会涉及钾离子外流
现在小妹我不懂图4(a)的实验方法要怎麽做
他为什麽会用western来测,要测的是什麽
小妹资历不深 还请各位赐教
有打错的 先说不好意思了...
谢谢大家!!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 120.124.32.50
※ 文章网址: http://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1413177837.A.5CB.html
1F：推 laurel007: 利用「抑制药」降低active caspase-1的产生 10/13 14:05
2F：→ laurel007: 证明P.acnes可以让caspase-1变成active form 10/13 14:09
3F：→ laurel007: 所以lane 4使用抑制剂後，caspase-1的active form变少 10/13 14:10
4F：→ laurel007: 许多证明signaling pathway的实验会使用这方法 10/13 14:13
5F：→ laurel007: 如果我有说错的话，还请各位指正。 10/13 14:16
6F：推 chaunen: Result 2: P. acnes -> caspase1-> IL-1B secretion 10/13 14:20
7F：→ chaunen: glybenclamide透过抑制ATP-sensitive K+ channels 阻断 10/13 14:20
8F：→ chaunen: caspase1活化, (Lamkanfi et al., 2009b) 10/13 14:20
9F：→ chaunen: 作者假设 P. acnes -> K+ exfflux -> caspase1-> IL-1B 10/13 14:20
10F：→ chaunen: fig.4 发现glybenclamide 抑制细胞内的caspase1活化(a) 10/13 14:21
11F：→ chaunen: 同时也抑制IL-1Bsecretion(b) 10/13 14:21
12F：推 chaunen: 只用1种药就下结论有点危险 如果刚好是side-effect怎半? 10/13 14:26
13F：推 laurel007: Z-YVAD-FMK是positive control;推文真不方便Orz 10/13 14:41
14F：推 chaunen: fig.4a 由於caspase1的active form需要切下一部份peptide 10/13 14:42
15F：→ chaunen: 所以分子量会变小 用WB刚刚好~ 10/13 14:42
16F：→ blence: chaunen说的不太对,glybenclamide并不会抑制IL-1b分泌(4b) 10/13 19:37
17F：→ blence: 而是抑制P. acnes->K+ exfflux,所以解释药物效果有针对性 10/13 19:40
18F：推 chaunen: 我懂了! 所以glybenclamide只会抑制P. acnes造成的IL-1b 10/13 20:02
19F：→ chaunen: 分泌 并不影响basal的secretion 凸显K+efflux参与的重要 10/13 20:05
20F：→ chaunen: 我果然还是太嫩了XD 10/13 20:06