作者Beproasd (逼波)
看板Biotech
标题[求救] 蛋白免疫反应阻抗量测
时间Fri Oct 24 21:21:56 2014
第一次发文，不知道发在这里对不对
想请教各位前辈
我的实验是在金电极上做化学修饰以接上抗体来固定抗原蛋白，并量测其阻抗讯号做norm
alized来比较变化量
实验装置是采微流道设计，修饰步骤依序为
SH-PEG-COOH(12hr) > EDC/NHS(30min) > Anti-BSA-Rabbit(30min) > Biotin(30min) >
FITC-BSA(30min)
Biotin是作为Blocking使用
分别取修饰抗体後量测到的阻抗值作为对照组Z0,并取嫁接完抗原蛋白後量测到的阻抗值
作为Z1,最後Z1-Z0做Normalized得到结果
理论上做完修饰接完蛋白後阻抗值应该要增加才对
但不知为何我normalized结果都变负值
也就是说相较於修饰抗体後，接完抗原蛋白的阻抗值却降低了
这个问题困扰我很久了，请各位前辈帮忙解答，感激不尽!
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※ 编辑: Beproasd (36.239.42.122), 10/24/2014 22:57:25
※ 编辑: Beproasd (36.239.42.122), 10/24/2014 22:57:55
※ 编辑: Beproasd (36.239.42.122), 10/24/2014 22:58:51
1F：→ blence: 外行的问,是只要做完任何稼接,就会导致阻抗值的增加? 10/25 00:11
2F：→ blence: 另外如果只是要用anti-BSA抓BSA antigen,为什麽要接FITC? 10/25 00:11
3F：→ Beproasd: 理论上阻抗应该要增加，接FITC是因为要观察抗原蛋白的 10/25 01:16
4F：→ Beproasd: 萤光讯号 10/25 01:16