作者ncbi (低调，D掉。)
看板Biotech
标题Re: [求救] 请问关於α-MSH的问题
时间Mon Oct 27 15:05:59 2014
引用搜寻到2012年版友的疑问
目前有在用B16-F10做实验 也是想要做原料是否具有美白效果的评估
目前已尝试到：
seeding 1*10^5 cells/ml in 24-well (high glucose DMEM+10% FBS)-->
用100nM、500nM、1uM等剂量的α-MSH(stock溶於水)刺激3天-->
PBS wash後每well加100ul含10% DMSO的1N NaOH溶液@60度C 1小时破细胞-->
最後量405nm的吸光值
但不管有无加α-MSH，吸光值都很低阿!!(低於0.1)
肉眼看是有点颜色 但非常淡
不知道是否有先进能提供宝贵意见呢？
感谢orz
※ 引述《ben00691206 (Ben)》之铭言：
: α-MSH是能够刺激黑色素细胞产生黑色素的hormone
: 而很多篇paper都只用100 nM就可以induce B16细胞的黑色素生成至少2倍以上
: 但我在实验室用0.5μM treat B16细胞无法induce，甚至用到15μM一样看不到明显的黑
: 色素生成(24小时收)
: 想请问一下这是为什麽
: 是不是α-MSH坏掉还是细胞敏感度的问题?
: 谢谢
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 1.34.191.172
※ 文章网址: http://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1414393562.A.EF7.html
※ 编辑: ncbi (1.34.191.172), 10/27/2014 15:19:21
※ 编辑: ncbi (1.34.191.172), 10/27/2014 15:19:57
※ 编辑: ncbi (1.34.191.172), 10/27/2014 15:27:47
1F：推 ab90377: 我们做法细胞是1*10^7培养ㄧ天後再加a-MSH 10nM ，16小 01/02 00:01
2F：→ ab90377: 时後就收细胞， 你收细胞的做法可以改变ㄧ下，我们测到 01/02 00:01
3F：→ ab90377: 的OD至少都有0.5 01/02 00:01