作者chenmick ()
看板Biotech
标题[求救] seeding 96-well/ATPlite 高手
时间Thu Nov 6 11:07:53 2014
我要把细胞种在96-well plate,加药後用ATPlite测细胞存活率
但是error bars都超大,在想是因为细胞不均匀还是ATPlite没做好:
1.细胞调完浓度後倒到dish,用八爪吸200ul加到96-well
但细胞都会聚集在well的边边,well中间的细胞都比较少,
请问seed的时候有什麽要特别注意的吗?
定点加or绕着圆圈加? 慢慢加or快快加? 加玩摇一摇or静置10~15min?
2.在加完ATPlite的的试剂後都会产生很多泡泡,请问这些泡泡影响仪器侦测冷光吗?
感恩~
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1F：→ blence: 看描述,种到96well没有至少放置o/n让cell贴附？ 11/06 11:13
2F：→ blence: 96well很好分的,沿壁面正常速度加入,不必摇就很均匀 11/06 11:17
3F：→ blence: 另外96well装到200ul,离溢满的高度应该不远了 11/06 11:20
4F：→ chenmick: 有让细胞贴o/n,隔天才加药 sorry 11/06 15:45
5F：→ raiyu: 2泡泡会影响 11/07 08:14
6F：→ raiyu: 虽然我觉得你的误差大是因为泡泡跟细胞是不是在well边无关 11/07 08:19
7F：→ raiyu: 但可以 试改成loading 100ul 11/07 08:22
8F：→ moon0126: 浓度调100-150ul/well,吸过量在加到well 11/11 00:02