作者grassshan (纸飞机啊欧欧踢欸死)
看板Biotech
标题[求救] MTT assay缩小浓度范围存活率却也变低了!
时间Mon Nov 17 15:53:28 2014
最近实验在做筛选用药浓度的MTT assay
一开始拉大区间的测试 100/ 125/ 250/ 400/ 500/ 750/ 1000
因为之後要做分化，所以加药培养三天後才做MTT，
结果出来是400 ug/ml的浓度以上都会死很夸张，存活率都不到一成
而中间的浓度像是250、125也会死个两、三成（就存活率大概７成多一点），
但浓度100的则是存活率可达九成四！
跟老师讨论过後是先试试看浓度100以下的存活率，
於是我就设定了100 / 50 / 25 / 12.5 / 6.25
但我这次跑了三四盘了，100ug/ml的浓度的组别...
存活率只有七成 囧！！！
要到12.5ug/ml的浓度才会达到近九成的存活
为什麽只是把浓度范围缩小，存活率也降低了阿阿阿阿阿
ㄒ＿ㄒ
我使用序列对半稀释的方式，先配置最大的所需浓度後，
再依序稀释成需要的浓度。
为什麽结果出来会这样Q_Q
我实验的浓度到底要怎麽抓来使用阿阿阿 >_<
--
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1F：推 sean0912: 既然已经算出存活率 应该是有跟Control比较 感觉是两次 11/18 06:25
2F：→ sean0912: control的情况不一样 导致比值出来存活率有差 11/18 06:26
3F：→ untilnow: 问题可能出在你配的方法 一开始100是由1000稀释下来 11/19 11:46
4F：→ untilnow: 稀释後可能很偏离原先的100了 11/19 11:48
5F：→ untilnow: 但第二次最高浓度就是100 所以直接反应100浓度的结果 11/19 11:49
6F：→ untilnow: 当然也有可能因为配药方的方便度, 1000的好配, 100的反 11/19 11:50
7F：→ untilnow: 而因量太小而产生较大误差....所以才会远成第二次死很大 11/19 11:51
8F：→ grassshan: S大～我有想过跟细胞状况是不是有关系，但出来的结果 11/19 15:41
9F：→ grassshan: … 11/19 15:41
10F：→ grassshan: 应该不会差那麽多吧？！ 11/19 15:41
11F：→ grassshan: U大！我最大浓度第二次是配浓度200直接对半稀释，在犹 11/19 15:43
12F：→ grassshan: 豫是否直接1000再做1/10稀释？！ 11/19 15:43
13F：→ grassshan: 但这样浓度区间该怎麽判定呢… 11/19 15:43
14F：→ untilnow: 1000做 1/10稀释没有必要吧 第一次实验是帮助你缩小范 11/20 14:24
15F：→ untilnow: 围 你不如说说你的稀释用量 用多少体积稀释了多少 11/20 14:34
16F：→ untilnow: 容不容易造成配置浓度上误差 11/20 14:34