作者hsin37 (因祸得福???)
看板Biotech
标题[求救] Real-time PCR的PCR efficiency~
时间Thu Nov 20 19:37:29 2014
想请问大家，
做Relative quantification的real-time PCR前
都会先确认PCR efficiency吗?
查的文献说一定要统一PCR efficiency
做出来的数据才有意义....
可是我们老师认为没有做的必要，
没有人在做....问了隔壁研究室的前辈，
也说他们实验室也没有人在确认这个的，
请问大家的实验室也不会确认吗?
这样做出来的DATA发表paper的话，会不会有问题呢?
谢谢回答^^
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1F：推 qiet: 很多人都没有做, 但建议可以测试一下较安心 11/20 22:10
3F：→ skyken10: 一下这篇paper，你就会知道需不需要做了！ 11/21 01:01
4F：推 liuse: 你不做要怎麽算之後的data 都当成double per cycle? 11/21 08:50
5F：推 svc1213: 投稿时 ，曾经被问过 。 11/22 23:58
6F：→ WinnieDad: 的确不少researchers和publications就直接假设是2了… 11/23 14:08
7F：推 LeonPPK: 可以加做一个standard curve就可以确认了 12/01 00:16
8F：推 jabari: 你有几个gene要测?大於4个的话直接改算相对表现量改变 12/03 19:17
9F：→ jabari: 反正你有放control 又有house keeping 多於4个基因还作eff 12/03 19:18
10F：→ jabari: 只会杀了自己尤其是(真)standard curve是算copy number的 12/03 19:18
11F：→ jabari: 打太快 是改用'进阶'相对表现量改变 就是有个对照基本样品 12/03 19:20
12F：推 gps0110: 借这篇问一下 如果用ddCt法做relative quantification的 12/04 01:57
13F：→ gps0110: 话 需要每盘都有housekeeping gene吗？sample很多 一盘 12/04 01:57
14F：→ gps0110: 放不下 每盘都要housekeeping gene的话要做的量一下子多 12/04 01:57
15F：→ gps0110: 好多 12/04 01:57