作者t123401221 (沉默玩具)
看板Biotech
标题[方法]请问WB的band要怎样压片让他看起来比较圆?
时间Tue Jan 6 18:00:42 2015
请问各位先进
我要看大约38KDa的分子GAPDH
跑12.5% SDS-PAGE 电压80 V
但transfer完膜染ponceau S都可以看到明显的band
接着就是接抗体1抗1:1000 o/n 二抗1:12000 室温1小时
但是手洗压片,压个五分钟
压出来的band都很弱而且band都扁扁的
而且band跟band之间都没有间距看起来好像都连在一起
可以麻烦各位帮我解决这个问题吗??
谢谢各位^^
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1F：→ a90648: 贴个图上来吧!! 这样比较容易知道问题在哪 01/06 18:08
2F：→ blence: 哪一家的GAPDH抗体要这样做,如果常用的抗体,这条件早烧了 01/06 18:35
3F：→ a90648: 其实以他的叙述来看应该是过强全黏在一起了 01/06 18:36
4F：→ Bows: 我们家全新的GADPH只 hybrud 1小时就超亮了.. 01/06 18:41
5F：→ roy047: GAPDH一抗1:1000.... 01/06 18:44
6F：推 chaunen: 感觉是protein太多.. 01/06 19:53
7F：推 tynse71864: 1抗1：3000试试？ 01/07 13:22