作者a14743535 (pig)
看板Biotech
标题[求救] 3T3-L1分化
时间Tue Jan 13 15:28:16 2015
小弟最近在养脂肪细胞
但是觉得养不太好
分化的时候总是会有几个well的细胞有开始脱落的现象
想请问板上有没有
有经验的可以分享一些在诱导分化的时候的小撇步
可以尽量减少这个情况的发生
谢谢大家了
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1F：推 yuasa: Gelatin coating your plates 01/13 19:49
2F：→ zoe77101y: 分化的medium会使细胞比较不贴,建议种多一点看看！ 01/14 08:26
3F：推 ararthur: 代数问题 可以试着全部都不加antibiotics 我的经验是能 01/15 14:17
4F：→ ararthur: 稍微帮助 但也应该要准备买新的细胞了 3T3L1是有限的 01/15 14:18
5F：→ a14743535: 代数大概在多少以内的比较适合呢？ 01/15 15:33
6F：推 ararthur: 这很难讲 现在从ATCC或BCRC买到的都是unknown 但基本上 01/20 16:01
7F：→ ararthur: 他们手上会出货的都还是有分化能力 就我经验 BCRC去年买 01/20 16:02
8F：→ ararthur: 的 好像从PU+6开始 我用到PU+12左右就快撑不住了 如果有 01/20 16:03
9F：→ ararthur: 可仰赖的实验室能分享年轻一点的细胞或许能要看看 01/20 16:03
10F：→ ararthur: subculture请用1xPBS wash两次 0.5x trypsinize 1min 01/20 16:05
11F：→ ararthur: 70%前一定要subculture 并且不能太稀 顶多1:4-1:6 01/20 16:06
12F：→ ararthur: 吸differention medium时 不要吸太乾净 也离细胞远一点 01/20 16:07
13F：→ ararthur: 6-well plate是我目前的极限 以前都可以用12-well轻松做 01/20 16:08
14F：→ ararthur: 如果细胞边缘一直容易脱落 enlarge scale是可行办法 01/20 16:10
15F：→ ararthur: 我目前能想到的就是这样了 在这个3T3-L1末法时代走过4年 01/20 16:10
16F：→ ararthur: 不得不想办法存活啊 01/20 16:11