作者lucy19900409 (lucy)
看板Biotech
标题[求救] transformation 完菌长不起来
时间Fri Jan 30 10:35:35 2015
我将plasmid transformation到yeast
以抗生素G418筛选
长出来後colony PCR check完 确实转进去了
也批了yeast chromosome的DNA确定它是yeast
结果此colony点出来要另外放大却一直长不起来
在YPD-G418 plate或液态medium都是
放了3天还长不起来
想请问大家也有遇过这样的情况吗?
这中间哪里有出问题吗?
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1F：→ Ianthegood: 第一片plate摆太久 g418坏了? 01/30 12:55
2F：推 Mistletoe921: 重做吧比较快,yeast我没做过,但先前作其他菌的转殖, 01/30 17:17
3F：→ Mistletoe921: 有时在PCR check时也很莫名的被蒙很多次,也可能是 01/30 17:18
4F：→ Mistletoe921: PCR的reagent有污染喔 01/30 17:18
5F：推 as862437: 在确定insert同时一起subculture,确保同只 01/31 03:26