作者Telcontar (皮皮)
看板Biotech
标题[求救] 总酚含量的测定（分光光度计的使用方式）
时间Tue Mar 3 18:24:54 2015
小弟不知道是不是自己的操作过程错了，
因为我是照别人跟我说的做，但小弟一直无法重现文献的实验结果
请各位帮我看看，谢谢
我是使用总酚含量的测定(Folin-Ciocalteu的试剂测定)，先做检量线
方法：配置不同浓度的没食子酸(0~100μg/ml)各取30μl，
加入100μl 2N Folin试剂，接着加入2ml的水，
最後再加入1ml 20%碳酸钠，放置两小时後测定其在750nm的吸收度
分光光度计的方法他是跟我说：
blank(当背景)：放入sample + 2ml的水 + 1ml 碳酸钠 （归零）
实验组：放入sample + 100μl Folin试剂+2ml的水 + 1ml 碳酸钠
请问小弟操作分光光度计有错吗？因为做出来的检量线Ｒ^2=0.9993
但以未知的萃取物换算相对浓度的时候却跟文献不一致（差很大）
因为分光光度计他是口头跟我说的，所以我也不知道我是不是做错了，
还是背景要放甲醇（我是用甲醇配没食子酸的）或去离子水归零？
网路上似乎也没有详细的说明分光光度计的使用方式，如果有的话请告知我，谢谢
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1F：→ Ianthegood: blank也要有meoh跟folin 03/03 18:38
2F：→ Telcontar: 不好意思，小弟知识浅薄，如果加Folin那要怎麽比色？ 03/03 18:44
3F：→ Telcontar: 如果加了请问要怎麽比较颜色的变化？谢谢 03/03 18:45
4F：→ Ianthegood: 就看颜色变多少啊 03/03 19:04
5F：→ Telcontar: 对不起，真的不太懂@@ 这样blank和其他样品槽差在哪? 03/03 19:27
6F：→ scherzoinb: blank：sample + 水 + 碳酸钠 + meoh 03/03 20:28
7F：→ scherzoinb: 应该是这样吧~~~ 03/03 20:28
8F：→ Telcontar: 样品本身是溶在甲醇中 03/03 21:22
9F：推 payton103075: Blank是把实验组的sample取代为溶sample的溶剂 03/03 23:21
10F：→ JIM7809230: Gallic acid 溶水也可 03/07 12:29