作者chaichi (chaichi)
看板Biotech
标题[讨论] 数完细胞後如何种细胞?
时间Thu Mar 12 22:14:43 2015
不好意思
我知道,这是一个很蠢的问题
但我还是觉得很困扰
是这样的
我数细胞的方式是PBS洗过7.8分满的细胞後
使用trypsin切下细胞
吸到15CC离心管
离心後,吸掉上轻液
因为胚很大
所以我用5CC medium去冲散胚
然後开始使用血球计数器来计算细胞
10ul细胞+10ultrypan blue
假设我算出500颗细胞
我算四格
套入公式=300/4再X2X10000=1500000
那我想要再种500000个细胞进入dish内
请问我要吸多少体积的细胞进入?
是直接1500000/500000就好?
还是我要把我数完细胞代入公式算出的1500000再乘以我用5CC的medium去打散胚
然後再用我想种的细胞数500000/(1500000X5)?
请问是应该用哪一种算法?
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1F：推 wanderchang: 去看一次公式怎麽来的就不会忘了 03/12 23:43
2F：→ blence: 比较5cc或只用1cc去打散,得到的计数细胞数会不一样吗？ 03/12 23:44
3F：推 gps0110: 你要种500000的final volume是多少 03/13 00:42
4F：推 gps0110: 用5cc冲散的那些细胞浓度就是1500000cells/ml 03/13 00:44
5F：推 gps0110: 最简单就是你把那5cc dilute3倍(就是再加10cc media) 混 03/13 00:48
6F：→ gps0110: 均匀之後取这其中1cc里面就有你要的500000个细胞 03/13 00:48
7F：→ chaichi: 我是要种到6cm的dish内 03/13 03:16
8F：推 gps0110: 那你可以拿1ml的5cc dilute3倍的溶液到6cm dish 03/13 05:46
9F：→ gps0110: 再用无细胞的media补到够cover整个well的volume就可以了 03/13 05:46
10F：→ trumpet: 算了500颗，公式里面却是300/4?? 03/13 14:09
11F：→ cuss3146: 我看完有跟楼上一样的疑问 还在想这公式和我背得不太一 03/13 14:20
12F：→ cuss3146: 样... 03/13 14:20
13F：推 gps0110: 300应该是笔误吧XD 不过这样变成要dilute 5倍 03/13 18:19
14F：→ chaichi: 抱歉,300那个是笔误,应该是500去除 03/14 00:50
15F：→ chaichi: 感谢大家的回答,我懂要怎麽办了 03/14 00:51
16F：推 sunny1st: 算出150000是浓度单位cell/mL，当然是用要种的数目除浓 03/14 14:33
17F：→ sunny1st: 度 500000/1500000才对阿。上面少打一个0 03/14 14:34
18F：推 greendeer: 我通常不会算超过300颗耶，因为太多会不准 04/18 12:27