作者ararthur ()
看板Biotech
标题[方法] 直接vortex cell pellet?
时间Tue Mar 17 15:19:38 2015
在某个染色实验protocol里看到一个步骤有点陌生
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10. Add 2 mL of 1X assay buffer to each tube.
11. Mix each tube.
12. Centrifuge the stained cells at < 200 X g for 5 minutes at RT.
13. Carefully remove and discard supernatants.
14. Gently vortex the pellets to disrupt any cell-to-cell clumping.
^^^^^^^^^^^^^^^^^^
15. Resuspend the cells in 1 mL of 1X assay buffer.
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如果不是我理解错误，
它应该是叫我直接vortex cell pellet without buffer没错吧？
因为我做了4年多的细胞实验，
好像没有做过直接vortex cell pellet的经验
这样的步骤合理吗？ 还是它纯粹是step.14 &15写颠倒？
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※ 编辑: ararthur (140.112.121.122), 03/17/2015 15:20:22
1F：→ fentanyl945: 关键字是那个 gently 03/17 22:06
2F：→ ararthur: 请问楼上是否做过直接vortex cell pellet的实验呢 03/18 00:07
3F：推 lilyj: 我们每次算细胞染Trypan Blue前都vortex耶,除了一些很娇贵 03/18 01:33
4F：→ lilyj: 的细胞处理方式要不一样, 大部分都可vortex吧 03/18 01:34
5F：→ ararthur: 请问是在medium removed情况下vortex吗? 我通常只pipett 03/18 12:02
6F：→ ararthur: -ing而已 03/18 12:02
7F：→ tz2733: 因为步骤13液体无法去除很乾净 15加buffer前希望细胞散开 03/19 20:03
8F：→ Ice9: 手指头多敲几下就好了。 03/20 09:15