小弟目前在做sirt1酵素的纯化
此酵素是从addgene公司买来的
之後养在BL21 E coli细菌後
经过一般步骤
最後用his tag purification resin进行纯化
最後做SDS跑胶时发现我的major band在110kda以上
不过addgene买来的sirt1上面写大概在81kda
不知道是哪里出问题
请高手帮忙><
http://i.imgur.com/8WZIInx.jpg
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 101.14.19.58
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1F：→ Ianthegood: 有addgene的资料吗 03/25 10:57
※ 编辑: dennissnake (101.14.19.58), 03/25/2015 11:03:11
2F：→ blence: sirt1各家Ab染出来的都是110kda附近,81kda是seq predict 03/25 11:07
4F：→ dennissnake: 这是addgene的sirt1 03/25 14:11
6F：→ dennissnake: 分子量差这麽多是因为他除了his tag外还有其他tag吗! 03/25 14:12
7F：→ dennissnake: ?? 03/25 14:12
8F：→ dennissnake: 差30kda感觉颇大QQ 03/25 14:12
10F：→ GG810424: mage/BML-SA427_WB.jpg 03/25 15:52
11F：→ blence: 都说FL就110了怎会去怀疑tag，这种情况常有，少见多怪 03/25 16:27
12F：→ dennissnake: FL是什麽意思阿? 03/25 20:35
13F：→ e104582001: full length 03/26 01:46
14F：→ dennissnake: 那请问有人看过sirt1跑胶结果分子量是110的相关paper 03/29 22:18
15F：→ dennissnake: 吗 我也觉得我做的是对的 想拿出证据给老师瞧瞧XD 03/29 22:18