作者gto33456789 (太人生了)
看板Biotech
标题[求救] pET24a与pET28a的差别
时间Wed Apr 29 16:07:12 2015
实验作细菌表现病毒蛋白
我制作了蛋白质表现的载体pET24a和28a
在同样IPTG浓度以及时间下，我的蛋白质都可以被表现出来
但pET40b却没有表现
查了一下书，发现28a在N和C端都有histag
而24a只有N端有，其它的差异我看不懂
T7-tag一个有一个没有
请问以我的实验需求(拿来打兔子作抗体)
这两个载体有什麽差异吗?
而为什麽pET40b却又表现不出来?
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推 pen88:以前觉得 鬼塚22岁还是处男很好笑 现在我笑不出来 10/19 01:47
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1F：→ huuban: pET40b有DsbC fusion protein 04/29 18:18
2F：→ blence: 28a只有N端His,两者也都有T7-tag,查书有? 还是pET manual? 04/29 23:43
3F：→ huuban: 28a是两端都有His吧 04/30 01:01
4F：推 eric1210: 28a两端都有his ，his可用来纯化 ，你要打兔子蛋白要大 05/01 15:19
5F：→ eric1210: 量表现，所以必需留一个 05/01 15:19
6F：推 eric1210: 40b我没用过 ，你有没有确认好primer设计？若接上去产 05/01 15:24
7F：→ eric1210: 生shift就不会表现了 05/01 15:24
8F：→ blence: 我想说的是28b才算有C端His,28a的必须修正,因inframe不对 05/01 15:28