作者cheug0653 (Tiny Orbit)
看板Biotech
标题[求救] MTT数值怪异
时间Sun May 10 23:05:12 2015
http://www.trevigen.com/docs/protocol_4890-XX-K.pdf
我是按照这个Protocol做实验的
顺序一模一样 都没有少做(但没写在上面的我也没多做)
(如果怀疑我可能有认知错的地方也可以提出 谢谢)
唯一不同的是给我的detergent reagent不是Cat# 4890-25-02
是4892-010-02 我想问是不是厂商给我的药有错 如不是请继续往下看
两次实验的结果 blank的吸光值都在0.35上下
control大都0.70上下
问题是药物的浓度愈高 竟然吸光值是愈高的
第二次我多做了细胞数的不同
3x10^4/well的(100% 70% 50% 30% 10%)细胞数的control吸光值
并没有发现显着差异
趋势也和第一次实验一样 药浓度愈高 吸光值愈高(0.7一路增加到1.3)
目前我无法处理数据 请各位资深的朋友多帮忙指正罗
感谢
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1F：→ zoe77101y: 时间呢？放多久！！ 05/11 08:23
2F：→ cheug0653: 贴24小 作用24小 mtt2.5小 detergent 2.5小 目前叫厂商 05/11 18:10
3F：→ cheug0653: 换药 因为应该是送错药了 我当初问还说没问题= = 05/11 18:11
4F：→ blence: 看用词有点不习惯&如果了解MTT,换之前加DMSO就先看结果了 05/11 19:13
5F：推 DrPiGu: 你们的药是不是在650也有吸光值? 先扫一次看看 05/12 02:20
6F：→ cheug0653: 原本Protocol中的那支药是SDS 不是DMSO喔 05/12 12:48
7F：→ cheug0653: 650是吧 我会试看看 谢谢 05/12 12:48
8F：→ cheug0653: 我是新手 只照着Protocol做 因为没有人在旁指导QQ 05/12 12:49
9F：推 qiet: 肉眼看结晶就知道结果了, 跟用什麽solvent应该比较无关 05/12 23:24
10F：→ qiet: 波长只要是在说明书范围内应该都没问题 05/12 23:25
11F：推 qiet: 不同细胞数那边的结果是得不到预期差异的意思? 05/12 23:27
12F：推 qiet: 也是有可能使用的MTT不适合你用的细胞株... 05/12 23:29
13F：→ qiet: 或药物可能会影响到去氢酶酵素的活性 ~"~ 05/12 23:30
14F：→ qiet: 但blank(medium only?)那麽高药可能怪怪的, 换了做一次就知 05/12 23:31