作者eddieody (欧弟)
看板Biotech
标题[求救] EGFP only 代表的意义？
时间Thu May 14 14:26:36 2015
小弟刚接触 transfection ,
有练习用 confocal 去看 cells 的 protein 运送的情形
有个地方不太了解，EGFP 是个萤光 protein，常会看到某 gene/EGFP 的 plasmid DNA
来 transfection, 意思是要让某 gene 的量增加，并且有 EGFP 可以追纵，
那麽，一般还会用一个只有 EGFP only 来当 control, 我不了解只单独 transfection E
GFP 时，发萤光的就只是送进 cells 内的 EGFP protein, 这样的意义是为什麽呢？这样
从 EGFP only 的 cells 观察到他绿色萤光不就只是单纯的 EGFP 吗？怎麽跟实验组比较
？
能当实验组的 control 的原因是什麽？
我查了一些简单的文献还是不太懂。。。
有人可以指点一下吗？谢谢。
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 140.109.49.20
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※ 编辑: eddieody (140.109.49.20), 05/14/2015 14:32:22
1F：→ Bows: 因为你实验组里面也有送EGFP进去，你能保证你的结果不会是05/14 14:33
2F：→ Bows: EGFP造成的吗?05/14 14:33
3F：→ Bows: 要让细胞间的差异只有你的target protein 05/14 14:34
4F：→ Bows: 所以除了target以外，实验组有的对照组都要有 05/14 14:34
5F：推 leptoneta: 证明你的结果是送入基因造成 而不是送入EGFP造成05/14 15:54
6F：→ leptoneta: 比如说你把药溶於DMSO 那你control组就要加DMSO 05/14 15:55
7F：→ eddieody: 所以说假设我treat样品後 05/14 17:03
8F：→ eddieody: 在confocal 发现某gene /EGPF从他会从细胞质跑到细胞膜 05/14 17:03
9F：→ eddieody: ，那麽 EGFP only 组没萤光大部分都还在细胞质内，所以05/14 17:03
10F：→ eddieody: 代表是那个 gene 是确时在treat 後有这样的能力对吧？05/14 17:04
11F：→ eddieody: ？05/14 17:04
※ 编辑: eddieody (140.109.49.20), 05/14/2015 18:50:26
12F：推 e104582001: yes 05/14 21:52
13F：→ eddieody: 感谢各位的解答 05/15 09:19
14F：→ Ice9: 另外还有当 transfection efficiency 的指标——如果你的实 05/15 10:01
15F：→ Ice9: 验组 plasmid 上没有 EGFP gene 的话。 05/15 10:02