作者kakutsuchi (想要重新开始~~~)
看板Biotech
标题[求救] 关於IMR32的一些问题
时间Tue Jun 16 15:32:13 2015
关於IMR32我想问一下这边有没有人有做过这株细胞
因为碰到蛮大的问题
所以上来求救
我的培养条件
DMEM(low glucose)
+ 10% FBS
+ 2mM L-glutamine,
+ 1% NEAA
+ 1% P/S
细胞状态可以养满~
但镜检的时候会有不少漂浮的细胞(或是细胞碎片?)
继代的时候1盘只能分成2盘
因为回load太少的话~细胞会长的很慢~
就算是1盘分2盘的状态
通常长满还是要4天
而且2天时候需要换一次medium
继代方法没有用typsin
直接拍一拍他就掉下来了
((超容易飘
请问这样的状况是正常的嘛?
世界消耗medium的阿~
而且这样一盘75T养满的状态
全部打下来
总共也才 4~5 X 10^6而已
请问有大大们养过这株细胞嘛?
这样的状态是正常的嘛?
恳请大家帮忙
谢谢大家了!!
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1F：→ leave1027: 我有养过这株细胞、但我DMEM是ㄧ般没有low glucose 06/16 18:21
2F：→ leave1027: 因为这细胞会有像触角会伸出、所以可能看起来还没满盘 06/16 18:24
3F：→ leave1027: 但其实他已经满盘 06/16 18:24
4F：→ leave1027: 如果你需要大量细胞、就是多种几个flask罗！还有他飘 06/16 18:25
5F：→ leave1027: 来飘去表示状态已经不是很好了 06/16 18:25
6F：→ leave1027: 我以前做一次实验也是分个8～10 flask才够 06/16 18:26
7F：→ leave1027: 希望有帮助到你 06/16 18:27
8F：→ stone1105: 我也是用正常的glucose，不过容易飘好像正常 06/17 16:36
谢谢两位!!!
那如果我今天要打在裸鼠上面的话
medium是不是要去掉p/s比较好
我查了一下paper
好像一只裸鼠都需要打到至少 6 X 10^6 ~ 1 X 10^7 左右!
这样子超消耗75T flask的阿Orz
※ 编辑: kakutsuchi (134.208.25.200), 06/17/2015 17:36:53