作者a089336395 (小欣欣)
看板Biotech
标题[求救] western 制胶问题
时间Tue Aug 4 11:03:59 2015
各位大大...
最近换到了新的实验室，胶就开始出现鬼打墙的漏sample的问题...
主要问题就是在loading sample的时候，sample会从上胶的well中漏到下胶的上缘，大概
两三次都出现相同的情况...所以开始抓错:
1.已从副厂玻璃换成原厂
2.重新配制tris 8.8,6.8
3.确定甲醇压胶时吸乾并挥发完全
4.提高Aps的使用量，并重新於-20解冻新的...
5.非常小心的拔齿疏
但还是会出现这个状况...
也怀疑是齿疏的问题，但漏的well是随机的，所以暂时排除..
有没有人也遇到相同的问题呢??
求救...已崩溃!!
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1F：推 david6602ok: 这样不就省了上胶跑的时间，会扩散吗？ 08/04 11:22
2F：→ blence: 齿梳比厚玻璃还厚? 08/04 11:30
3F：→ a90648: 铝板有残胶? 08/04 11:42
4F：推 ararthur: Comb太厚吧 gel casting时要很用力插进去吗 08/04 11:56
5F：→ a089336395: 是用bio rad原厂1mm的玻璃跟comb, 08/04 12:49
6F：→ a089336395: 就是sample会扩散，导致量不准 08/04 12:49
7F：→ blence: 1mm的comb跟玻璃还蛮特别的,应该不是用0.75或1.5mm？ 08/04 14:13
8F：推 captdavince: acrylamide? 08/04 15:43
9F：→ huosheng: 先前遇过漏的问题, 有可能是在胶与玻璃产生间隙导致,但 08/04 17:42
10F：→ huosheng: 不影响跑胶结果 08/04 17:43
11F：推 gps0110: 我用原厂comb有时也有这种问题 08/04 21:33
12F：推 ron55663: 齿梳大小有差 太厚会漏胶 以前也遇过 08/05 13:03
13F：→ a089336395: 所以觉的是comb,而不是做胶本身试剂的问题吗？ 08/05 14:01
14F：推 gps0110: 我们实验室同样biorad的comb 应该是相同厚度的 厚度却有 08/05 22:46
15F：→ gps0110: 点诧异 插comb的时候蛮明显能感受出来 08/05 22:46
16F：推 LIAR: 我用副厂的器具都不会有这种现象。玻璃片两边有清乾净？ 08/09 11:46