作者marugucci (Gucci)
看板Biotech
标题[讨论] 小鼠在 intrasplenic implantation 後死
时间Fri Aug 21 11:24:47 2015
我过去做过好多次的 intrasplenic injection tumor cells
所以，技术上应该没问题
但是
最近一次从LASCO进的 SCID mice 才发生这样的现象
只要一打完，小鼠就显得很虚弱....
不管保温、心脏按摩....最後都回天乏术
我试了其他细胞株，也发生同样的情形....一直猜不透原因??
我处理的条件如下:
tumor cells [2.0E+06/40 uL]
老鼠气麻後，手术打开腹腔，於spleen 注入 40 uL
手术缝合...
手术过程含缝合约5~10分钟
因为伤口都很小 [< 1 cm]
对於非经由spleen 的 orthotopic mice
约在下一只小鼠手术完成後，都已经可以很活跃走动
然而 spleen injection mice 却显得失温且无力...
我这一批 20 SCID mice 分成3次实验做完，一半做orthotopic，一半做intrasplenic
结果 intrasplenic group 全数阵亡!!
不晓得有人是否有经验，会是哪方面的问题? 免疫 shock ? 还是其他?
下周会再进一批老鼠，希望这个疑问得以解决...
谢谢赐教!
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1F：→ enolam: 细胞有无污染?suspension用的pbs或matrigel有无确认无endo 08/22 10:23
2F：→ enolam: toxin污染?或者你的癌细胞是有训练过好几次的特疏细胞株 08/22 10:23
3F：→ marugucci: 目前已知细胞打入pancreas 没问题，但打在spleen 就死 08/29 18:07
4F：→ beingho: 有可能是 leaky，下次测一下Ig 09/04 18:13
5F：→ evilest: 会不会是细胞流到静脉，造成肺部或心脏栓塞… 10/08 06:21
6F：→ evilest: 我做 liver orthotopic时，有的老鼠会大喘气然後阵亡 10/08 06:23
7F：→ evilest: 推测是推太猛，细胞冲到血循中，卡在肺脏，然後老鼠就GG 10/08 06:25
8F：推 evilest: 另外，加matrigel打到肝膜上死亡率超高，原因不明 10/08 06:30