作者kagami91582 (GaryJ)
看板Biotech
标题[求救] BrdU染色体相关问题
时间Thu Sep 17 17:07:09 2015
[帮朋友代PO]
想问一下有没有人有做过老鼠的脑的海马回切片染BrdU和DCX的实验?
我一开始染的时候BrdU和DCX都成功
但是BrdU一抗之前用完买了新的一管後BrdU就染不出来了
之後又跟厂商要了2管新的BrdU一抗和跟别的实验室借的一管也是都染不出来
也作了以下验证
1.本来以为是我自己有什麽疏失 但是找别人染也是一样结果
加上以前都有染成功 所以排除了中间操作的步骤有疏失
2.拿之前有染成功过的同一批片用新的BrdU染也没有东西
所以也排除是给老鼠打的BrdU有问题
3.染的片中DCX都没有问题 只有BrdU是暗的
虽然目前得出结论是厂商的一抗出问题
但是已经换了2管和别人家的1管都没有出来 感觉就很奇怪
不知道大家有没有头绪还有什麽东西我没注意到或别的测试方法
还是说真的是厂商雷? 我染了10几次了快崩溃了QAQ
PS:新买的一抗的编号有跟之前用完的那管一样的一管
也有换另一个编号的 然後是跟X晋买的
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1F：→ kagami91582: 补个照片 09/17 17:34
4F：推 milkberry: 可以参考这篇nature protocol 09/17 23:06
朋友表示会研究看看 再次感谢//
6F：→ milkberry: t.2006.224.html 09/17 23:06
7F：→ jack33: 你有记得先打洞(permeable)吗? 09/18 17:30
朋友表示有先打洞了
※ 编辑: kagami91582 (114.38.126.46), 09/19/2015 00:14:53
※ 编辑: kagami91582 (114.38.126.46), 09/19/2015 00:15:32
8F：→ williamyang: 有denature DNA吗?不然BrdU抗体会认不到 09/19 00:56
9F：推 pandagod: 用相同方式染，以前可以出来，新的染不出来，不同的只 10/06 12:33
10F：→ pandagod: 有抗体，那就是抗体出问题了阿，跟厂商反应比较快... 10/06 12:33
11F：→ pandagod: 另外抗体在运送过程的condition可能不一样，之前也发生 10/06 12:35
12F：→ pandagod: 过这样的情形也是请业务处理 10/06 12:35