作者mountain8110 (bugyellow)
看板Biotech
标题[求救] 重组短片段蛋白欲变成dimer的方法?
时间Fri Sep 18 23:35:25 2015
小弟最近在实验设计遇到问题,特地上
来请教各位大大。
如果要用E.coli表现一个重组蛋白,让它
在转译之後,两两互相作用才形dimer,
不知道有什麽好办法?
小弟目前是有想在欲表现蛋白後面接
Leucine zipper,可是找不太到Leucine
zipper的DNA序列。
不知道版上的大大有什麽好建议,看是
可以在後面接其他序列,或是什麽方法
可以取得LZ的DNA序列?
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※ 编辑: mountain8110 (111.243.19.238), 09/18/2015 23:41:21
1F:→ Ice9: NCBI上找有leucine zipper (ZIP等)的基因,然後找相对应的序 09/19 08:24
2F:→ Ice9: 列是什麽。NCBI->Gene->Nucleotide 09/19 08:24
3F:→ mountain8110: 有上去找过了,可是我找到的都是全基因,还有intron 09/19 10:31
4F:→ mountain8110: 在里面,不过还是感谢 09/19 10:31
5F:→ Ice9: 你没仔细找,或者打开的方式不对。我在首页的下拉式选单中, 09/19 15:10
6F:→ Ice9: 先选了Gene,再输入 leucine zipper homo sapiens,就出现一 09/19 15:10
7F:→ Ice9: 堆和有关的基因了。选了其中的BACH2(id:60468)和NRL(4901), 09/19 15:12
8F:→ Ice9: 在Gene页面右边的ToC有NCBI Ref Seq,点下就会跳到Ref Seq。 09/19 15:13
9F:→ Ice9: 以NRL为例,我点NM_0061773.1的mRNA序列,出现的页面中再以 09/19 15:14
10F:→ Ice9: 寻找leucine zipper关键字,就出现说明是690-775。 09/19 15:16
11F:→ Ice9: 但是,如果你只是想要 dimerize protein,可以再找合适的 09/19 15:21
12F:→ Ice9: interacting domain(s)。 09/19 15:25
13F:→ mountain8110: 感谢大大 ,可以顺便请叫一下 ,为什麽找到关於lueci 09/21 14:40
14F:→ mountain8110: ne zipper的文献都是十几年前的 ,比较少最近的 。 09/21 14:40
15F:→ mountain8110: 是因为在应用上有遇到什麽困难之类的吗? 09/21 14:40
16F:→ Ice9: 研究人员和农民差不多,可能是再研究下去也难有产出,因此就 09/21 20:04
17F:→ Ice9: 转换研究课题或转换研究对象去了吧?! 09/21 20:05