作者rusly (因风飞过蔷薇)
看板Biotech
标题[求救] trypsin 回溶流程
时间Thu Sep 24 10:40:18 2015
各位好
今天突然发现实验室里面大家 回溶trypsin的方法很不一致XD
我们实验室是在做蛋白质监定的 因此需要用trypsin把蛋白质切成胜肽
1)有的方法是 把trypsin从-20度取出，加buffer後放在冰里静置20~40分钟再使用
2)有的方法是 把trypsin从-20度取出，加buffer後直接在室温下放20分钟後开始使用
请问~~ 上述这两种方式有差很多吗@@
後者会让trypsin失去活性吗? 还是其实两者差异不大呢
请前辈们指教~~ 谢谢!!
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1F：推 caesar0926: 多少会。个人觉得重复解冻比较伤，另外trypsin作用最 09/24 11:35
2F：→ caesar0926: 好是在37度吧，室温20分应该是还好。是说是解冻还是回 09/24 11:36
3F：→ caesar0926: 溶??.. 09/24 11:36
4F：→ caesar0926: 结论是个人认为差异不大，但是硬要比2应该会伤一点。 09/24 11:38
5F：→ caesar0926: 个人意见有错请指正!谢谢 09/24 11:38
谢谢ceasar大的回覆!!! 上述的状况是要把粉状的trypsin加buffer成溶液的状况
※ 编辑: rusly (140.122.136.115), 09/24/2015 12:09:29
6F：推 icheee: 粉状的 trypsin 我都存在4'C 耶… 09/27 10:31
7F：推 joann88431: 其实....我都用手握住加温....(不要被学长姐发现的话X 10/04 10:43
8F：→ joann88431: D) 10/04 10:43
9F：→ chvkimo: 本lab 粉也是存放在4度C,还是你家买的是-20保存? 10/17 10:10
10F：→ chvkimo: 不的过我指的是cell culture用的 10/17 10:11
11F：→ rusly: 我们是保存在-20度喔！ 10/17 20:16